目的 探究睡眠剥夺引起心肌损伤的可能机制及内质网应激通过线粒体相关内质网膜(Mitochondria-associated endoplasmic reticulum membranes,MAMs)导致线粒体钙超载在其中的作用。 方法 取6-8周雄性C57BL/6小鼠27只,按随机数字表法分为对照组(NC组)、睡眠剥夺组(SD组)、睡眠剥夺+内质网应激抑制剂4-苯基丁酸(4-Phenylbutyric acid,4-PBA)组(SD+4-PBA组)。采用改良多平台水环境法构建小鼠睡眠剥夺模型;SD+4-PBA组小鼠在睡眠剥夺前腹腔注射20mg/kg 4-PBA;NC组及SD组注射同等剂量生理盐水。造模成功后,取小鼠心脏切片进行苏木精-伊红(H-E)染色观察小鼠心肌损伤情况、马森(Masson)染色和天狼猩红染色观察心肌纤维化情况,透射电子显微镜观察心肌MAMs和内质网的超微结构,钙离子荧光染色检测线粒体钙水平,免疫印迹法(Western blot)检测心肌内质网应激相关的C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)及MAMs钙转运相关的电压依赖性阴离子选择性通道1(voltage-dependent anion channel 1,VDAC1)、葡萄糖调节蛋白75(glucose-regulated protein 75,GRP75)、肌醇1,4,5-三磷酸受体(inositol 1,4,5-trisphosphate receptor,IP3R)的相对表达水平。 结果 与NC组比较:SD组心肌损伤情况、纤维化程度、MAMs及线粒体钙负荷明显加重,CHOP、GRP78、VDAC1、GRP75、IP3R蛋白表达水平明显升高(P0.05)。与SD组相比:SD+4-PBA组心肌损伤情况、纤维化程度、MAMs及线粒体钙负荷明显减轻,CHOP、GRP78、VDAC1、GRP75、IP3R蛋白表达水平明显下降(P0.05)。结论 睡眠剥夺会引起心肌细胞发生内质网应激,并通过MAMs导致线粒体钙超载进而引起心肌损伤。